发布日期：2025-01-04 10:06 点击次数：158
pRL-SV40-N(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因检测的质粒，主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的5' -UTR、启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性，或
用作萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参。也可以使用Bgl II和Pst I等位点切除SV40 early enhancer/promoter，以降低本底性的转录，并插入感兴趣的5' -UTR等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。研究3' -UTR并希望使用海肾荧光
素酶时，推荐使用D2768 pRL-SV40-C。
萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
pRL-SV40-N质粒含有SV40早期增强子和启动子，可以实现海肾萤光素酶在哺乳动物细胞内的高效表达。
pRL-SV40-N质粒携带renilla luciferase基因，编码分子量为36kD的海肾萤光素酶，翻译后无需修饰，常用于报告基因检 本质粒为氨苄抗性。
pRL-SV40-N质粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
SV40 early enhancer/promoter
7-418
Multiple cloning site
421-480
Chimeric intron
546-682
T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2)
726-744
T7 RNA polymerase transcription initiation site
743
Rluc reporter gene
754-1689
SV40 late polyadenylation signal
1731-1932
β-lactamase (Ampr) coding region
2079-2939
pRL-SV40-N质粒(3765bp)的图谱如下：
pRL-SV40-N的多克隆位点的详细图谱如下：
EcoRI
XhoI SacI MluI HindIII EcoRV
411
TTTTGCAAAA
AGCTCCTCGA
GGAGCTCACG
CGTAAGCTTG
AATTCGATAT
AAAACGTTTT
TCGAGGAGCT
CCTCGAGTGC
GCATTCGAAC
TTAAGCTATA
SalI SpeI ApaI
461
CGTCGACACT
AGTGGGCCCC
AGCTTGATTC
TTCTGACACA
ACAGTCTCGA
GCAGCTGTGA
TCACCCGGGG
TCGAACTAAG
AAGACTGTGT
TGTCAGAGCT
pRL-SV40-N中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRL-SV40-N)包括：
AatII
AgeI
AscI
BbeI
BlpI
BsgI
BsiWI
BsmBI
BspMII
BssHII
Bst1107I
BstEII
BstXI
Bsu36I
DraIII
Eco47III
Eco72I
EheI
EspI
FseI
KasI
MscI
NaeI
NarI
NdeI
NgoMI
NruI
PflMI
PmeI
PmlI
PpuMI
PspAI
RsrII
SacII
SapI
SmaI
SnaBI
SplI
SrfI
Tth111I
pRL-SV40-N中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRL-SV40-N once)包括：
BglII
A`GATC,T
1
XcmI
CCANNNN,N`NNNNTGG
1403
Acc65I
G`GTAC,C
54
BsrGI
T`GTAC,A
1452
Asp718
G`GTAC,C
54
BsaAI
YAC|GTR
1486
KpnI
G,GTAC`C
58
XbaI
T`CTAG,A
1691
PvuII
CAG|CTG
80
NotI
GC`GGCC,GC
1698
SfiI
GGCCN,NNN`NGGCC
357
EagI
C`GGCC,G
1698
StuI
AGG|CCT
403
XmaIII
C`GGCC,G
1698
AvrII
C`CTAG,G
404
HpaI
GTT|AAC
1841
AvaI
C`YCGR,G
426
MunI
C`AATT,G
1850
PaeR7I
C`TCGA,G
426
ClaI
AT`CG,AT
1936
XhoI
C`TCGA,G
426
BsaBI
GATNN|NNATC
1942
SacI
G,AGCT`C
436
BamHI
G`GATC,C
1943
MluI
A`CGCG,T
438
SspI
AAT|ATT
2061
HinDIII
A`AGCT,T
444
Bsp1286I
G,DGCH`C
2283
EcoRI
G`AATT,C
450
AhaII
GR`CG,YC
2326
EcoRV
GAT|ATC
458
BsaHI
GR`CG,YC
2326
SalI
G`TCGA,C
462
HinII
GR`CG,YC
2326
AccI
GT`MK,AC
463
PvuI
CG,AT`CG
2497
SpeI
A`CTAG,T
468
EcoNI
CCTNN`N,NNAGG
2505
Bsp120I
G`GGCC,C
474
Cfr10I
R`CCGG,Y
2781
EcoO109I
RG`GNC,CY
475
BpmI
CTGGAG 22/20
2797
ApaI
G,GGCC`C
478
AhdI
GACNN,N`NNGTC
2866
PstI
C,TGCA`G
522
GsuI
CTGGAG 21/19`
2796
BspMI
ACCTGC 10/14
536
PleI
GAGTC 9/10
2875
NheI
G`CTAG,C
744
HgiEII
ACCNNNNNNGGT1/13
3165
BsiCI
TT`CG,AA
760
AlwNI
CAG,NNN`CTG
3345
BstBI
TT`CG,AA
760
HaeII
R,GCGC`Y
3514
pRL-SV40-N质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
T7 Primer(726-744): TAATACGACTCACTATAGG
pRL-SV40-N的全序列信息： D2762 pRL-SV40-N-seq.txt
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
D2762-1μg
pRL-SV40-N(报告基因质粒)
1μg
D2762-100μg
pRL-SV40-N(报告基因质粒)
100μg
—
说明书
1份
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
